序論：在您撰寫鄉(xiāng)人大主席述職報(bào)告時(shí)，參考他人的優(yōu)秀作品可以開(kāi)闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。

第1篇

我于XX年11月任**鄉(xiāng)黨委委員、人大主席。按照鄉(xiāng)黨委的分工，我主持鄉(xiāng)人大全面工作，先后分管產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)、移民、林業(yè)、辦公室及內(nèi)務(wù)后勤等工作。兩年來(lái)在鄉(xiāng)黨委政府的統(tǒng)一部署下，在抓好人大業(yè)務(wù)工作的的同時(shí)，大力推進(jìn)了水產(chǎn)強(qiáng)鄉(xiāng)和林業(yè)興鄉(xiāng)步伐，努力維護(hù)庫(kù)區(qū)移民群眾的穩(wěn)定和發(fā)展，取得了良好的成績(jī)，得到了人民群眾的認(rèn)可，也提高了自身綜合素質(zhì)。兩年來(lái)出勤865天，住鄉(xiāng)751天，下村715天，未請(qǐng)一天假。現(xiàn)將我兩年來(lái)的德、能、勤、績(jī)、廉等情況向各位領(lǐng)導(dǎo)和同志匯報(bào)如下：

一、突出抓好水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，打造水產(chǎn)強(qiáng)鄉(xiāng)

水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)是我鄉(xiāng)的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，我已連續(xù)三年分管這項(xiàng)工作，現(xiàn)該產(chǎn)業(yè)已初具規(guī)模，全鄉(xiāng)網(wǎng)箱養(yǎng)魚總量已達(dá)到23000口（其中美國(guó)斑點(diǎn)叉尾鮰6450口），攔網(wǎng)養(yǎng)魚12處1600畝，養(yǎng)有各類品種18個(gè)，年成魚起水量6500噸，年產(chǎn)值達(dá)4000萬(wàn)元。兩年來(lái)我主要開(kāi)展的工作是穩(wěn)產(chǎn)業(yè)、調(diào)結(jié)構(gòu)、增效益。一是取得了重大魚病疫情防控工作的勝利。今年4月10日起，我鄉(xiāng)的美國(guó)斑點(diǎn)叉尾鮰爆發(fā)了以細(xì)菌性敗血癥和套腸病為主的重大魚病疫情，作為此次魚病防控工作的主要指揮人員，我與縣移民局和水產(chǎn)公司領(lǐng)導(dǎo)通力合作，連續(xù)奮戰(zhàn)45天，召開(kāi)工作聯(lián)席會(huì)議15次，發(fā)動(dòng)鄉(xiāng)村兩級(jí)干部60多人，深入到所有養(yǎng)殖戶網(wǎng)箱，全力開(kāi)展魚病防控工作。保住存活成魚XX噸，處置清理死魚1360噸，取得了今年全國(guó)同類水庫(kù)魚病防控工作的最好成績(jī)，保住了60%的美國(guó)斑點(diǎn)叉尾鮰成魚，穩(wěn)住了整個(gè)網(wǎng)箱養(yǎng)魚產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。二是積極進(jìn)行品種結(jié)構(gòu)調(diào)整，化解養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。為改變我鄉(xiāng)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、品種單一、風(fēng)險(xiǎn)集中的情況，我與縣水產(chǎn)公司一道積極引導(dǎo)養(yǎng)殖戶進(jìn)行了科學(xué)地品種結(jié)構(gòu)調(diào)整，擴(kuò)大了四大家魚的養(yǎng)殖量，引進(jìn)了部分名特優(yōu)魚種。引進(jìn)了丁桂魚、加州鱸、翹魚、匙尾鱘等魚種，加大了鰱魚、青魚、草魚、鱖魚等養(yǎng)殖量，使養(yǎng)殖區(qū)域的品種結(jié)構(gòu)逐步趨于合理。三是探索科學(xué)的產(chǎn)業(yè)發(fā)展模式，提高市場(chǎng)化程度、增加養(yǎng)殖效益。與縣移民局領(lǐng)導(dǎo)和公司人員一道，多次深入到養(yǎng)殖重點(diǎn)村、養(yǎng)殖大戶開(kāi)展座談、調(diào)研，把水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的工作重點(diǎn)放在了提高產(chǎn)業(yè)發(fā)展的組織化和市場(chǎng)化程度、進(jìn)行品牌化經(jīng)營(yíng)上來(lái)。開(kāi)展了實(shí)施大庫(kù)攔網(wǎng)養(yǎng)魚和引進(jìn)成魚加工廠等項(xiàng)目的前期籌備工作,正在撰寫推進(jìn)五強(qiáng)溪庫(kù)區(qū)漁業(yè)發(fā)展的調(diào)研文章。

二、突出抓好山區(qū)林業(yè)，實(shí)施林業(yè)興鄉(xiāng)

**鄉(xiāng)是湖南省林業(yè)采伐制度改革試點(diǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)之一，全鄉(xiāng)共有林地面積13.1萬(wàn)畝，其中公益生態(tài)林9.8萬(wàn)畝，活立蓄積量252438立方米，退耕還林及荒山造林11047畝，每年林農(nóng)可獲得退耕還林等各項(xiàng)補(bǔ)貼290多萬(wàn)元，全年商品材出材量在7000方左右，林農(nóng)可獲益300萬(wàn)元，林業(yè)也是我鄉(xiāng)繼水產(chǎn)養(yǎng)殖后的又一支柱產(chǎn)業(yè)。我分管林業(yè)工作也有兩年時(shí)間，在XX年全面完成林業(yè)采伐制度試點(diǎn)改革和集體林權(quán)制度改革任務(wù)后，今年上半年主要開(kāi)展的工作就是認(rèn)真落實(shí)《森林經(jīng)營(yíng)方案》，落實(shí)改革措施。主要開(kāi)展了四項(xiàng)工作。一是把好林木采伐許可證的發(fā)放關(guān)，嚴(yán)格按照《森林經(jīng)營(yíng)方案》的要求，采取由林農(nóng)提出采伐申請(qǐng)、村林業(yè)理事會(huì)進(jìn)行公示，然后進(jìn)行作業(yè)設(shè)計(jì)和審批，按照“陽(yáng)光林業(yè)”的要求進(jìn)行采伐計(jì)劃的分配和采伐證許可證的發(fā)放，目前已落實(shí)商品材采伐任務(wù)6500方；二是把好采伐跡地的植被恢復(fù)關(guān)，只砍不造或重砍輕造是林業(yè)采伐長(zhǎng)期存在的弊端，為此，XX年我們實(shí)施了造林保金制度，并帶領(lǐng)林業(yè)站工作人員深入山場(chǎng)督促農(nóng)戶煉山、造林，完成煉山面積XX畝，新造工業(yè)原料林1000畝，三邊綠化造林200畝；三是把好木材運(yùn)輸證的檢尺關(guān)，XX年我們嚴(yán)格按按照《湖南省林木運(yùn)輸證辦理程序》進(jìn)行操作，要求每次商品材裝船裝車，林業(yè)站必須現(xiàn)場(chǎng)檢尺，村林業(yè)員到場(chǎng)監(jiān)督，防治大面積的超方或木材走私現(xiàn)象，保證了國(guó)家稅費(fèi)和林農(nóng)的利益不受損失；四是把好山林糾紛的調(diào)處關(guān)，我鄉(xiāng)XX年還剩有16處2800多畝糾紛地沒(méi)有發(fā)證，為全面完成發(fā)證任務(wù)，我和林業(yè)站工作人員一道及時(shí)深入到山塊、村組進(jìn)行調(diào)查和調(diào)處，現(xiàn)已完成調(diào)處任務(wù)7處1300畝面積，全年可全部完成任務(wù)。

第2篇

一、 認(rèn)真學(xué)習(xí)，努力提高自身素質(zhì)

當(dāng)今時(shí)代，要想服務(wù)于人民群眾，就必須認(rèn)真學(xué)習(xí)理論知識(shí)，努力提高自身素質(zhì)。為此，本人能不斷地學(xué)習(xí)“三個(gè)代表”重要思想和深入學(xué)習(xí)貫徹落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀，以及學(xué)習(xí)黨的各項(xiàng)路線、方針、政策以及國(guó)家法律、法規(guī)、努力提高自身理論水平，提高執(zhí)政能力。

二、 恪守職責(zé)，認(rèn)真搞好本職工作

鄉(xiāng)鎮(zhèn)人大工作在人民心目中是一種修養(yǎng)職業(yè)，認(rèn)為這個(gè)部門是可有可無(wú)的，但通過(guò)接觸，人大改變了我的觀念，知道這是一個(gè)負(fù)有重任的崗位，它要代表人民搞好各項(xiàng)監(jiān)督、討論各項(xiàng)重要決策，參與經(jīng)濟(jì)建設(shè)的實(shí)施。

半年來(lái)，我配合人大主席組織主席團(tuán)成員和市、鎮(zhèn)人大代表視察了我鎮(zhèn)農(nóng)房災(zāi)后重建、“六進(jìn)村”和村級(jí)活動(dòng)場(chǎng)所建設(shè)等重點(diǎn)工程建設(shè)，聽(tīng)取鎮(zhèn)人民政府劉昌海、梁成二位副鎮(zhèn)長(zhǎng)的工作匯報(bào)，按照主席團(tuán)的工作安排對(duì)學(xué)校工程、農(nóng)村集中點(diǎn)建房等提出建議并指出不足及提出整改意見(jiàn)。二是能堅(jiān)持走訪代表，收集各方面意見(jiàn)，為黨委的各項(xiàng)決策提供重要依據(jù)，同時(shí)也能提出一些參考意見(jiàn)和建議。能服從黨委安排，積極參加各項(xiàng)中心工作并能認(rèn)真扎實(shí)地完成好。

三、 求真務(wù)實(shí)，勤政為民，認(rèn)真搞好駐村工作

鄉(xiāng)鎮(zhèn)干部每年都要駐1—2個(gè)村，每年不管黨委安排我駐哪個(gè)村，我都能兢兢業(yè)業(yè)、努力工作，不但能很好完成黨委下達(dá)所駐村的各項(xiàng)任務(wù)，還能會(huì)同村干部一道解決一些疑難問(wèn)題或辦一件實(shí)事。今年繼續(xù)駐慶云村并協(xié)助村兩委工作，結(jié)合新形勢(shì)、新任務(wù)，按照黨委政府“三級(jí)聯(lián)創(chuàng)”工作的安排意見(jiàn)，針對(duì)所駐村“兩委”班子現(xiàn)狀，協(xié)助村“兩委”召開(kāi)班子會(huì)議，黨員群眾代表會(huì)議，廣泛征求意見(jiàn)，確定創(chuàng)建“五好”村黨支部的創(chuàng)建措施。同時(shí)，協(xié)助村“兩委”班子制定20__年精神文明及經(jīng)濟(jì)發(fā)展計(jì)劃，做到目標(biāo)明確、任務(wù)明確、職責(zé)明確。同時(shí)為擴(kuò)大“五好”村黨支部創(chuàng)建的實(shí)效，按照市委組織部的要求，在全面繼續(xù)深入開(kāi)展“黨員系列教育月”活動(dòng)，在個(gè)別村組開(kāi)展了“四培養(yǎng)”活動(dòng)等，協(xié)助搞好村部的擴(kuò)建工作積極引導(dǎo)做好該村鄉(xiāng)村旅游“農(nóng)家樂(lè)”的開(kāi)發(fā)。

四、 扎實(shí)推進(jìn)災(zāi)后重建工作

確保農(nóng)村永久性住房建設(shè)有序進(jìn)行農(nóng)村工作是全部工作的基礎(chǔ)。為使廣大農(nóng)村受災(zāi)群眾早日住進(jìn)經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、安全的永久性住房，積極協(xié)助黨委政府圍繞重心，出謀劃策。面對(duì)復(fù)雜的農(nóng)村永久性住房重建工作，積極協(xié)助學(xué)校災(zāi)后重建的拆遷、督促學(xué)校工程建設(shè)質(zhì)量進(jìn)度，認(rèn)真抓好學(xué)校安全工作，搞好學(xué)校周邊環(huán)境整治、確保社會(huì)穩(wěn)定。 “保安民、保穩(wěn)定”是一項(xiàng)急迫的事情。隨著災(zāi)后重建工作的持續(xù)推進(jìn)，為讓群眾知曉政策、克服等、靠、觀、望的思想，我積極下鄉(xiāng)活動(dòng)，走進(jìn)田間地頭、向群眾宣傳政策、接受咨詢，引導(dǎo)和鼓勵(lì)受災(zāi)農(nóng)戶不等不靠，就地取材，進(jìn)行重建。我所駐的__鎮(zhèn)慶云村，是我鎮(zhèn)的邊遠(yuǎn)村，僅靠紅巖、敖平，為德陽(yáng)、成都兩市的交界地方，在落實(shí)災(zāi)后重建政策時(shí)難度較大，社會(huì)信息復(fù)雜，工作難度不可想象。在經(jīng)過(guò)艱苦細(xì)致的工作，在駐村工作組村兩委的共同努力下，慶云村的災(zāi)后建設(shè)取得了可喜成績(jī)，全村有住房680多戶，完成重建400多戶，取得了干部黨員滿意，受災(zāi)群眾滿意，受到了黨委政府的肯定，全面的完成了農(nóng)房的重建任務(wù)。

五、 廉潔自律，真心實(shí)意為服務(wù)

第3篇

2007年9月21日上午，一場(chǎng)代表向選民述職的報(bào)告會(huì)在象山縣東陳鄉(xiāng)樟岙村會(huì)議室舉行，縣人大代表姜文武向選區(qū)的選民代表鄭重地述職。

這是東陳鄉(xiāng)人大自2006年實(shí)行代表向選民述職制度以來(lái)，組織舉行的第二場(chǎng)述職報(bào)告會(huì)。樟岙等13個(gè)村、70余位選民代表參加了會(huì)議。會(huì)上，縣人大代表姜文武，鄉(xiāng)人大代表王春娟、鮑宏友、徐亞紅分別向選民代表作述職報(bào)告。

真誠(chéng)面對(duì)選民

2006年，象山縣東陳鄉(xiāng)人大根據(jù)有關(guān)法律規(guī)定，建立人大代表向選民述職制度。鄉(xiāng)人大召開(kāi)主席團(tuán)會(huì)議，要求8名縣人大代表、55名鄉(xiāng)人大代表任期內(nèi)分別完成向選民述職的工作。還召開(kāi)述職動(dòng)員會(huì)，要求述職代表撰寫書面述職報(bào)告，并于規(guī)定時(shí)間內(nèi)送鄉(xiāng)人大。東陳鄉(xiāng)人大代表向選民述職制度還規(guī)定，代表述職的主要內(nèi)容是：對(duì)代表工作的認(rèn)識(shí)和重視情況；出席會(huì)議情況，包括參加人代會(huì)聽(tīng)取和審議鄉(xiāng)人大、鄉(xiāng)政府工作報(bào)告，審議表決各項(xiàng)決定、決議，依法選舉地方國(guó)家機(jī)關(guān)組成人員等情況；閉會(huì)期間參加視察、檢查、評(píng)議、座談等活動(dòng)情況；走訪選民，聯(lián)系群眾，反映民意，為選民辦實(shí)事情況；履行代表職責(zé)的體會(huì)，以及存在的不足和今后的打算，等等。

述職報(bào)告會(huì)氣氛嚴(yán)肅認(rèn)真。

鄉(xiāng)人大代表徐亞紅在2007年鄉(xiāng)人代會(huì)上領(lǐng)銜提出關(guān)于要求解決鄉(xiāng)中學(xué)生接送車問(wèn)題、關(guān)于要求加大對(duì)水桶岙垃圾場(chǎng)治蠅治污治臭力度等建議，受到鄉(xiāng)政府重視，被列入重點(diǎn)實(shí)事工程予以解決。徐亞紅是民營(yíng)企業(yè)的一名紡織女工，她經(jīng)常利用休息日和晚上時(shí)間進(jìn)村入戶，深入到選民中去，聽(tīng)取選民意見(jiàn)，為解決選民的實(shí)際問(wèn)題而奔走。她的述職報(bào)告事例充實(shí)，受到了選民代表的肯定。

鄉(xiāng)十五屆、十六屆人大代表王春娟先后在鄉(xiāng)人代會(huì)上領(lǐng)銜提出關(guān)于要求建造東陳自來(lái)水廠凈化池、關(guān)于要求加強(qiáng)南盤水庫(kù)水質(zhì)污染整治力度、關(guān)于要求安裝盛寧線沙崗到南堡段路燈等12件建議，都得到了政府部門的認(rèn)真辦理，贏得了選民的贊許。在述職報(bào)告會(huì)上，面對(duì)選民代表們的掌聲，王春娟鄭重地承諾：“選民給我的擔(dān)子，我一定要繼續(xù)挑好！”

與會(huì)選民代表充分肯定了姜文武等4位人大代表履行代表職務(wù)所取得的成績(jī)，并當(dāng)場(chǎng)就建造松岙水庫(kù)、完善二輪土地承包等問(wèn)題向人大代表提出了意見(jiàn)和建議。選民代表還要求人大代表要多擠出些時(shí)間到選民中去走一走、看一看、聽(tīng)一聽(tīng)，把老百姓的呼聲反映到縣、鄉(xiāng)人代會(huì)上，多為選民辦幾件看得見(jiàn)摸得著的實(shí)事。

做一名“陽(yáng)光人大代表”

能面對(duì)面地監(jiān)督人大代表履行職責(zé)情況，選民代表陳瑞棉感到十分高興。他認(rèn)為，“人大代表為群眾做了哪些事情，是否履行應(yīng)盡的職責(zé)，為民代言的能力怎么樣，這些問(wèn)題以前對(duì)我們選民來(lái)說(shuō)十分陌生。現(xiàn)在，通過(guò)代表向選民述職的形式，我們可以更好地了解和監(jiān)督人大代表，這是對(duì)我們選民的尊重。”

選民代表勵(lì)加強(qiáng)十分感慨地說(shuō)：“今天，我們選民評(píng)議人大代表，真真切切成了主人翁。”他還說(shuō)，“我以前也當(dāng)過(guò)一屆鄉(xiāng)人大代表。從產(chǎn)生到屆滿，只有代表來(lái)監(jiān)督政府及其部門，從來(lái)沒(méi)有選民來(lái)監(jiān)督代表履職。現(xiàn)在自己以選民的身份來(lái)評(píng)議監(jiān)督人大代表，并把自己的訴求通過(guò)代表反映到人代會(huì)上去，反映到政府部門那里去，為我們選民解決實(shí)際問(wèn)題，我們?cè)诒O(jiān)督代表的同時(shí)，自己也受到了教育。”

第4篇

為了進(jìn)一步加強(qiáng)人大代表與選民的聯(lián)系，提高人大代表的履職能力，充分發(fā)揮人大代表在各自工作崗位上的作用，達(dá)縣趙固鄉(xiāng)人大主席團(tuán)于××年10月24日組織縣、鄉(xiāng)人大代表和部分選民參加縣、鄉(xiāng)人大代表的述職活動(dòng)。

參加這次述職活動(dòng)的縣、鄉(xiāng)人大代表和部分選民42人（其中：選民12人）。在這次述職活動(dòng)中，有縣人大代表%%3人述職。參會(huì)代表認(rèn)真聽(tīng)取了3位代表的述職，并就他們的述職報(bào)告結(jié)合平時(shí)的工作情況進(jìn)行了評(píng)議。

××同志作為縣人大代表和南井村支部書記，不僅認(rèn)真做好自己的本職工作，加強(qiáng)黨員隊(duì)伍建設(shè)，發(fā)動(dòng)黨員帶領(lǐng)全村人民發(fā)家至富；還經(jīng)常關(guān)心和注意聽(tīng)取群眾的呼聲，及時(shí)反映社情民意。200*年，他帶領(lǐng)全村人民走集約化農(nóng)業(yè)道路，調(diào)整產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，取得了較好的成績(jī)，為我鄉(xiāng)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展積累了先進(jìn)的經(jīng)驗(yàn)。

鄉(xiāng)人大代表××總結(jié)到，他在認(rèn)真聽(tīng)取人民群眾的呼聲的同時(shí)，認(rèn)真做好本職工作。特別是分管的民政工作和計(jì)劃生育工作，在黨委政府的堅(jiān)強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)下和全體工作人員的共同努力下均取得了較好的成績(jī)。一是加強(qiáng)干部監(jiān)督和社會(huì)監(jiān)督相結(jié)合的方式，不斷增強(qiáng)低保評(píng)議工作的透明度，深入到村社，實(shí)地走訪群眾，了解群眾疾苦，確保低保工作應(yīng)保盡保；二是針對(duì)我鄉(xiāng)計(jì)劃生育工作思想認(rèn)識(shí)提高難、超計(jì)劃生育統(tǒng)計(jì)難和違法生育處理的“三難問(wèn)題”，加強(qiáng)政策宣傳和執(zhí)法工作，有力地推動(dòng)了計(jì)劃生育工作的落實(shí)。

第5篇

大家下午好！

我鄉(xiāng)人大在縣人大常委會(huì)的關(guān)心指導(dǎo)下，在鄉(xiāng)黨委的堅(jiān)強(qiáng)有力領(lǐng)導(dǎo)下，能夠從實(shí)際出發(fā)，圍繞發(fā)展中心，突出工作重點(diǎn)，扎實(shí)有效地開(kāi)展人大工作。現(xiàn)將我鄉(xiāng)今年的工作情況和下一步工作計(jì)劃匯報(bào)如下，不妥之處敬請(qǐng)各位領(lǐng)導(dǎo)和代表們批評(píng)指正。

一、開(kāi)展規(guī)范化建設(shè)活動(dòng)，夯實(shí)人大工作基礎(chǔ)

一是以村辦公室為陣地，建設(shè)“代表之家”。把全鄉(xiāng)的縣鄉(xiāng)人大代表劃分4個(gè)代表小組，按照便于代表活動(dòng)的原則，以村辦公室為陣地，建設(shè)4個(gè)“代表之家”。二是加強(qiáng)制度建設(shè)，使人大工作正常化。建立了人大代表學(xué)習(xí)制度、視察制度、聯(lián)系制度、評(píng)議制度和代表小組活動(dòng)制度以及代表議案、建議辦理制度等六項(xiàng)制度。三是落實(shí)工作人員，規(guī)范人大檔案。

二、順利召開(kāi)了我鄉(xiāng)十二屆人大三次會(huì)議

2009年4月份，在縣人大有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)的親自指導(dǎo)下，在鄉(xiāng)黨委的領(lǐng)導(dǎo)下，根據(jù)法定程序，我鄉(xiāng)順利召開(kāi)了鄉(xiāng)十二屆人大三次會(huì)議，圓滿完成了各項(xiàng)會(huì)議議程。

三、認(rèn)真開(kāi)展工作評(píng)議活動(dòng)

2009年元月5日，在鄉(xiāng)黨委的高度重視下，在鄉(xiāng)政府的大力支持下，鄉(xiāng)人大組織市、縣人大代表和鄉(xiāng)人大代表團(tuán)團(tuán)長(zhǎng)對(duì)鄉(xiāng)政府有關(guān)職能部門和鄉(xiāng)直有關(guān)單位進(jìn)行了工作評(píng)議。人大代表們認(rèn)真聽(tīng)取了各部門主要負(fù)責(zé)人的工作述職，在公正、公開(kāi)、公平的原則上，對(duì)8個(gè)參評(píng)單位進(jìn)行了量化打分評(píng)比，并在評(píng)議大會(huì)上現(xiàn)場(chǎng)頒獎(jiǎng)。縣人大常委會(huì)有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)不僅親自參加了工作評(píng)議，而且在會(huì)上作了重要講話，對(duì)評(píng)議活動(dòng)給予了高度評(píng)價(jià)。通過(guò)工作評(píng)議活動(dòng)，人大代表們一致認(rèn)為，鄉(xiāng)人大主席團(tuán)事前工作安排周密，準(zhǔn)備充分，各單位主要負(fù)責(zé)人對(duì)待工作評(píng)議態(tài)度積極，述職報(bào)告內(nèi)容詳實(shí)。此項(xiàng)工作不僅能督促被評(píng)議單位改善服務(wù)質(zhì)量、提高服務(wù)水平，更好地為群眾服務(wù)，還能提高被評(píng)議單位的對(duì)外形象，必將對(duì)我鄉(xiāng)經(jīng)濟(jì)社會(huì)又好又快發(fā)展起到積極的推動(dòng)作用。

四、圍繞發(fā)揮代表作用，積極開(kāi)展代表調(diào)研視察活動(dòng)

今年4月11日，鄉(xiāng)人大組織市、縣人大代表和鄉(xiāng)人大代表團(tuán)團(tuán)長(zhǎng)進(jìn)行了調(diào)研視察活動(dòng)。鄉(xiāng)政府有關(guān)職能部門和鄉(xiāng)直有關(guān)單位負(fù)責(zé)人也參加了此項(xiàng)活動(dòng)。通過(guò)對(duì)世華農(nóng)業(yè)設(shè)施栽培、500千伏變電所和華光新農(nóng)村等重點(diǎn)項(xiàng)目的調(diào)研視察。代表們一致認(rèn)為，近年來(lái)我鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整力度在加大，世華農(nóng)業(yè)設(shè)施栽培的發(fā)展填補(bǔ)了我鄉(xiāng)大棚蔬菜生產(chǎn)的空白；500千伏變電所的順利落地，提升了眾興鄉(xiāng)的對(duì)外形象；華光新農(nóng)村建設(shè)的順利實(shí)施，凝聚著黨委的心血和政府的工作力度，徹底改善了項(xiàng)目建設(shè)區(qū)農(nóng)民的生產(chǎn)、生活環(huán)境，有利于發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和旅游休閑產(chǎn)業(yè)，對(duì)眾興的經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展將起到積極的推動(dòng)作用。此舉得到了縣人大有關(guān)負(fù)責(zé)人的充分肯定。

五、積極圍繞鄉(xiāng)黨委開(kāi)展中心工作

今年以來(lái)，鄉(xiāng)人大在鄉(xiāng)黨委的領(lǐng)導(dǎo)下積極參加鄉(xiāng)中心工作。人大主席多次到村督察有關(guān)工作，并親自參與處理重點(diǎn)穩(wěn)定工作，人大副主席不辭勞苦的戰(zhàn)斗在新農(nóng)村建設(shè)的第一線，為華光新農(nóng)村建設(shè)做出了大量的扎實(shí)有效的工作。

今年我鄉(xiāng)人大雖做了一些工作，取得了一定成績(jī)，但與人民群眾期望還有一定的距離，與上級(jí)的要求還有很大差距。面臨新的形勢(shì)和任務(wù)，下一步，我鄉(xiāng)人大將在縣人大常委會(huì)的關(guān)心、指導(dǎo)下，在鄉(xiāng)黨委的領(lǐng)導(dǎo)下，以更加務(wù)實(shí)的作風(fēng)，圍繞發(fā)展中心，突出工作重點(diǎn)，注重工作實(shí)效，通過(guò)抓自身建設(shè)，抓代表活動(dòng)，抓督查督辦，使人大工作進(jìn)一步規(guī)范，人大代表的作用得到更好發(fā)揮，為推動(dòng)基層民主政治建設(shè)，促進(jìn)我鄉(xiāng)經(jīng)濟(jì)社會(huì)又好又快發(fā)展，將著重做好以下幾個(gè)方面工作：

一是加強(qiáng)制度建設(shè)，促進(jìn)人大工作規(guī)范化，夯實(shí)我鄉(xiāng)人大工作基礎(chǔ)；

二是圍繞社會(huì)熱點(diǎn)、難點(diǎn)問(wèn)題，積極組織代表活動(dòng)，計(jì)劃在11月份就新農(nóng)村建設(shè)、工業(yè)聚集區(qū)發(fā)展、村村通工程、農(nóng)業(yè)農(nóng)村工作再次開(kāi)展代表調(diào)研視察活動(dòng)；

三是開(kāi)展調(diào)研評(píng)議活動(dòng)，發(fā)揮代表的監(jiān)督作用。計(jì)劃在12月份對(duì)鄉(xiāng)政府辦站所和鄉(xiāng)直有關(guān)單位開(kāi)展工作評(píng)議活動(dòng)；

四是高度重視議案辦理，著力解決熱點(diǎn)難點(diǎn)問(wèn)題。積極開(kāi)展督查，推動(dòng)政府中心工作，特別是在新農(nóng)村建設(shè)、招商引資、工業(yè)經(jīng)濟(jì)、文明創(chuàng)建、村村通工程等方面重點(diǎn)展開(kāi)工作；

五是加強(qiáng)人大宣傳的信息報(bào)道工作，推進(jìn)民主法制建設(shè)；

第6篇

【關(guān)鍵詞】 川芎嗪注射液; 腹膜間皮細(xì)胞; 高糖; ⅰ型膠原; 基質(zhì)金屬蛋白酶?1; 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑?1; 體外實(shí)驗(yàn)

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 65?69.

received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

indexed/abstracted in and full text link?out at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.

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doi: 10.3736/jcim20090110open access

effects of ligustrazine injection on high glucose?induced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

gui?song zhu, jin?song he

department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 (mmp?1) and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 (timp?1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low?, medium? and high?dose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semi?quantitative reverse transcription?polymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 in culture supernatants were measured by enzyme?linked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucose?induced type ⅰ collagen and timp?1 expressions in a dose?dependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium? and high?dose ligustrazine injection could significantly increase mmp?1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp?1/timp?1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase?1; tissue inhibitor of metalloproteinase?1; in vitro

腹膜纖維化是腹膜透析治療的主要并發(fā)癥，最終導(dǎo)致腹膜功能衰竭，這是腹膜透析患者退出治療的主要原因［1］。腹膜纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ecm）的過(guò)度沉積為特點(diǎn)［2］。研究表明，ecm的過(guò)度沉積是由于ecm合成與降解失衡而引起［3］。ⅰ型膠原是腹膜纖維化中主要的ecm［4］，其降解過(guò)程受基質(zhì)金屬蛋白酶?1（matrix metalloproteinase?1, mmp?1）及其特異性抑制劑金屬蛋白酶組織抑制劑?1（tissue inhibitor of metalloproteinase?1, timp?1）調(diào)控［5］。有研究證實(shí)，高糖能上調(diào)腹膜間皮細(xì)胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型膠原和timp?1的表達(dá)，降低mmp?1活性［3］。本研究通過(guò)觀察川芎嗪注射液對(duì)高糖刺激下hpmcs ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)的影響，探討川芎嗪在防治腹膜纖維化中的作用及其機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 試劑和主要儀器 川芎嗪注射液（江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批準(zhǔn)號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江蘇方強(qiáng)制藥廠，批號(hào)為200710111）。磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi?1640粉劑等（gibco公司）；胰蛋白酶和瓊脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme?linked immunosorbent assay, elisa）試劑盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量檢測(cè)試劑盒（南京凱基生物科技公司）；ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物，m?mlv第一鏈cdna合成試劑盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗細(xì)胞角蛋白抗體、抗細(xì)胞波形蛋白抗體、第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體（北京中山生物技術(shù)有限公司）。nu?2500e二氧化碳培養(yǎng)箱（nuaire公司）；全自動(dòng)酶標(biāo)儀（biobank公司）；生物電泳圖像分析系統(tǒng)（上海復(fù)日科技有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 hpmcs的培養(yǎng)與鑒定 取來(lái)自南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院普外科擇期腹部手術(shù)患者（排除尿毒癥、腹膜炎）捐獻(xiàn)的大網(wǎng)膜組織，按文獻(xiàn)［3］方法原代培養(yǎng)hpmcs，按1?3傳代，第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)均由來(lái)自3個(gè)患者的標(biāo)本進(jìn)行3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。倒置相差顯微鏡觀察hpmcs呈多邊形，似鋪路鵝卵石樣外觀；免疫組化鑒定抗細(xì)胞角蛋白抗體和抗波形蛋白抗體染色陽(yáng)性，抗第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體染色陰性。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)步驟和分組 hpmcs用含1％fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液同步培養(yǎng)24 h后分為5組（每組設(shè)3個(gè)樣本）：正常組（完全培養(yǎng)液）、高糖對(duì)照組（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高劑量川芎嗪（10、20和40 mg/l）組。各組完全培養(yǎng)液均為含有15％ fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液。細(xì)胞置于37 ℃、5％ co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h。

1.2.3 elisa法檢測(cè)細(xì)胞上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1含量 分組干預(yù)48 h后，離心收集上清液，按elisa試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)水平。用0.1 mol/l naoh溶解細(xì)胞沉淀，bca蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定細(xì)胞沉淀中蛋白質(zhì)濃度，用相應(yīng)蛋白質(zhì)濃度結(jié)果校正檢測(cè)結(jié)果。

1.2.4 半定量rt?pcr 分組處理同上。采用trizol一步法提取總rna，2 μg總rna進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cdna，50 μl反應(yīng)體系進(jìn)行pcr擴(kuò)增，以β?actin作內(nèi)參照（引物序列及反應(yīng)條件見(jiàn)表1）。1.5％瓊脂糖凝膠電泳（110 v，15 min）進(jìn)行pcr產(chǎn)物鑒定，電泳圖像分析儀掃描分析，mrna相對(duì)含量用其pcr產(chǎn)物吸光值（absorance, a）與β?actin a值的比值表示。引物及pcr反應(yīng)條件見(jiàn)表1。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示，采用spss 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間差異比較采用單因素方差分析，兩組間均數(shù)比較采用lsd?t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 表1 ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物序列及pcr反應(yīng)條件

2 結(jié) 果

2.1 上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)水平 與正常組比較，高糖對(duì)照組上清液中ⅰ型膠原和timp?1含量顯著升高（p<0.01），mmp?1含量顯著下降（p<0.01）；與高糖對(duì)照組比較，低、中和高劑量川芎嗪組上清液中的ⅰ型膠原和timp?1含量顯著降低（p<0.05, p<0.01），且兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組上清液mmp?1含量顯著增加（p<0.01）。見(jiàn)表2。表2 各組上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)表達(dá)

2.2 hpmcsⅰ型膠原、mmp?1和timp?1 mrna的表達(dá) 與正常組比較，高糖對(duì)照組hpmcs ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna分別上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp?1/β?actin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；與高糖對(duì)照組相比，低、中、高劑量川芎嗪組ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna表達(dá)水平均顯著下調(diào)（p<0.05），兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組mmp?1/β?actin mrna表達(dá)顯著增加（p<0.05）。見(jiàn)圖1和圖2。

3 討 論

高糖透析液導(dǎo)致ecm過(guò)度沉積是腹膜纖維化的病理基礎(chǔ)［2］，研究表明，高糖不僅增加hpmcsⅰ型膠原的表達(dá)，并且引起ⅰ型膠原降解酶系mmp?1/timp?1的表達(dá)失衡［3］。我們的研究結(jié)果與之基本相同，此外我們發(fā)現(xiàn)，川芎嗪能顯著對(duì)抗高糖的上述作用。

在生理?xiàng)l件下，hpmcs可以產(chǎn)生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，幾乎能降解全部ecm成分。timps是內(nèi)源性分泌蛋白，作為mmps的特異性抑制因子，其n'端可與相應(yīng)的mmps催化活性中心的鋅離子結(jié)合而抑制其催化活性［7］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型膠原及其降解酶系mmp?1/timp?1分泌及表達(dá)的影響，旨在探討川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖環(huán)境下ⅰ型膠原的合成和降解的干預(yù)作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示，川芎嗪能顯著降低高糖所致的ⅰ型膠原的過(guò)度合成，同時(shí)顯著下調(diào)timp?1的表達(dá)，增加mmp?1的表達(dá)，提示川芎嗪亦能通過(guò)調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡，從而促進(jìn)ⅰ型膠原的降解，減少ecm沉積。由此我們推測(cè)，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用。

川芎嗪是中藥川芎的有效成分之一，屬酰胺類生物堿，具有活血化瘀的功效。藥理實(shí)驗(yàn)證明，川芎嗪具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫和鈣離子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型膠原、timp?1和增加mmp?1表達(dá)的機(jī)制尚不清楚。以往的研究發(fā)現(xiàn)這可能與抑制轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor?β1, tgf?β1）表達(dá)有關(guān)［9, 10］。tgf?β1是重要的致纖維化細(xì)胞因子，參與了腹膜纖維化的病理過(guò)程［2］。tgf?β1可增加ⅰ型膠原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型膠原降解減少［3, 11］。有研究報(bào)道，川芎嗪能降低多種細(xì)胞如心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的膠原合成和timp?1表達(dá)，而增加mmp?1的分泌和表達(dá)，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這可能是通過(guò)抑制tgf?β/smads信號(hào)傳導(dǎo)通路繼而抑制tgf?β1表達(dá)的結(jié)果［9, 10, 12］。我們前期研究證實(shí)，川芎嗪能下調(diào)高糖致hpmcs tgf?β1的表達(dá)（文章待發(fā)表）。因此我們推測(cè)，川芎嗪抑制tgf?β1的表達(dá)可能是其抑制hpmcs ⅰ型膠原合成和調(diào)整mmp?1/timp?1表達(dá)平衡的機(jī)制之一，其具體機(jī)制將是我們下一步要研究的內(nèi)容。

綜上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型膠原的過(guò)度合成，并且通過(guò)調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡，促進(jìn)ⅰ型膠原降解，從而減少ecm的沉積，防止腹膜纖維化的發(fā)生和發(fā)展。因此，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用，這對(duì)腹膜纖維化的機(jī)制及其防治的研究有一定借鑒和應(yīng)用價(jià)值。

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第7篇

【關(guān)鍵詞】  川芎嗪注射液; 腹膜間皮細(xì)胞; 高糖; ⅰ型膠原; 基質(zhì)金屬蛋白酶1; 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1; 體外實(shí)驗(yàn)

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 6569.

    received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

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    doi: 10.3736/jcim20090110open access

    effects of ligustrazine injection on high glucoseinduced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 and tissue inhibitor of metalloproteinase1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

    guisong zhu, jinsong he

    department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

    objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 (mmp1) and tissue inhibitor of metalloproteinase1 (timp1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

    methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low, medium and highdose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semiquantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 in culture supernatants were measured by enzymelinked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

    results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucoseinduced type ⅰ collagen and timp1 expressions in a dosedependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium and highdose ligustrazine injection could significantly increase mmp1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

    conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp1/timp1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

    keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase1; tissue inhibitor of metalloproteinase1; in vitro

    腹膜纖維化是腹膜透析治療的主要并發(fā)癥，最終導(dǎo)致腹膜功能衰竭，這是腹膜透析患者退出治療的主要原因［1］。腹膜纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ecm）的過(guò)度沉積為特點(diǎn)［2］。研究表明，ecm的過(guò)度沉積是由于ecm合成與降解失衡而引起［3］。ⅰ型膠原是腹膜纖維化中主要的ecm［4］，其降解過(guò)程受基質(zhì)金屬蛋白酶1（matrix metalloproteinase1, mmp1）及其特異性抑制劑金屬蛋白酶組織抑制劑1（tissue inhibitor of metalloproteinase1, timp1）調(diào)控［5］。有研究證實(shí)，高糖能上調(diào)腹膜間皮細(xì)胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型膠原和timp1的表達(dá)，降低mmp1活性［3］。本研究通過(guò)觀察川芎嗪注射液對(duì)高糖刺激下hpmcs ⅰ型膠原、mmp1和timp1表達(dá)的影響，探討川芎嗪在防治腹膜纖維化中的作用及其機(jī)制。

    1  材料和方法

    1.1  試劑和主要儀器  川芎嗪注射液（江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批準(zhǔn)號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江蘇方強(qiáng)制藥廠，批號(hào)為200710111）。磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi1640粉劑等（gibco公司）；胰蛋白酶和瓊脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型膠原、mmp1和timp1酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzymelinked immunosorbent assay, elisa）試劑盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量檢測(cè)試劑盒（南京凱基生物科技公司）；ⅰ型膠原、mmp1、timp1和βactin引物，mmlv第一鏈cdna合成試劑盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗細(xì)胞角蛋白抗體、抗細(xì)胞波形蛋白抗體、第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體（北京中山生物技術(shù)有限公司）。nu2500e二氧化碳培養(yǎng)箱（nuaire公司）；全自動(dòng)酶標(biāo)儀（biobank公司）；生物電泳圖像分析系統(tǒng)（上海復(fù)日科技有限公司）。

    1.2  實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1  hpmcs的培養(yǎng)與鑒定  取來(lái)自南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院普外科擇期腹部手術(shù)患者（排除尿毒癥、腹膜炎）捐獻(xiàn)的大網(wǎng)膜組織，按文獻(xiàn)［3］方法原代培養(yǎng)hpmcs，按1︰3傳代，第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)均由來(lái)自3個(gè)患者的標(biāo)本進(jìn)行3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。倒置相差顯微鏡觀察hpmcs呈多邊形，似鋪路鵝卵石樣外觀；免疫組化鑒定抗細(xì)胞角蛋白抗體和抗波形蛋白抗體染色陽(yáng)性，抗第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體染色陰性。

    1.2.2  實(shí)驗(yàn)步驟和分組  hpmcs用含1％fcs的rpmi1640培養(yǎng)液同步培養(yǎng)24 h后分為5組（每組設(shè)3個(gè)樣本）：正常組（完全培養(yǎng)液）、高糖對(duì)照組（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高劑量川芎嗪（10、20和40 mg/l）組。各組完全培養(yǎng)液均為含有15％ fcs的rpmi1640培養(yǎng)液。細(xì)胞置于37 ℃、5％ co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h。

    1.2.3  elisa法檢測(cè)細(xì)胞上清液中ⅰ型膠原、mmp1和timp1含量  分組干預(yù)48 h后，離心收集上清液，按elisa試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)ⅰ型膠原、mmp1和timp1表達(dá)水平。用0.1 mol/l naoh溶解細(xì)胞沉淀，bca蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定細(xì)胞沉淀中蛋白質(zhì)濃度，用相應(yīng)蛋白質(zhì)濃度結(jié)果校正檢測(cè)結(jié)果。

    1.2.4  半定量rtpcr  分組處理同上。采用trizol一步法提取總rna，2 μg總rna進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cdna，50 μl反應(yīng)體系進(jìn)行pcr擴(kuò)增，以βactin作內(nèi)參照（引物序列及反應(yīng)條件見(jiàn)表1）。1.5％瓊脂糖凝膠電泳（110 v，15 min）進(jìn)行pcr產(chǎn)物鑒定，電泳圖像分析儀掃描分析，mrna相對(duì)含量用其pcr產(chǎn)物吸光值（absorance, a）與βactin a值的比值表示。引物及pcr反應(yīng)條件見(jiàn)表1。

    1.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示，采用spss 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間差異比較采用單因素方差分析，兩組間均數(shù)比較采用lsdt檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 表1  ⅰ型膠原、mmp1、timp1和βactin引物序列及pcr反應(yīng)條件

    2  結(jié)  果

    2.1  上清液中ⅰ型膠原、mmp1和timp1蛋白質(zhì)水平  與正常組比較，高糖對(duì)照組上清液中ⅰ型膠原和timp1含量顯著升高（p<0.01），mmp1含量顯著下降（p<0.01）；與高糖對(duì)照組比較，低、中和高劑量川芎嗪組上清液中的ⅰ型膠原和timp1含量顯著降低（p<0.05, p<0.01），且兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組上清液mmp1含量顯著增加（p<0.01）。見(jiàn)表2。表2  各組上清液中ⅰ型膠原、mmp1和timp1蛋白質(zhì)表達(dá)

    2.2  hpmcsⅰ型膠原、mmp1和timp1 mrna的表達(dá)  與正常組比較，高糖對(duì)照組hpmcs ⅰ型膠原/βactin mrna和timp1/βactin mrna分別上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp1/βactin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；與高糖對(duì)照組相比，低、中、高劑量川芎嗪組ⅰ型膠原/βactin mrna和timp1/βactin mrna表達(dá)水平均顯著下調(diào)（p<0.05），兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組mmp1/βactin mrna表達(dá)顯著增加（p<0.05）。見(jiàn)圖1和圖2。

    3  討  論

    高糖透析液導(dǎo)致ecm過(guò)度沉積是腹膜纖維化的病理基礎(chǔ)［2］，研究表明，高糖不僅增加hpmcsⅰ型膠原的表達(dá)，并且引起ⅰ型膠原降解酶系mmp1/timp1的表達(dá)失衡［3］。我們的研究結(jié)果與之基本相同，此外我們發(fā)現(xiàn)，川芎嗪能顯著對(duì)抗高糖的上述作用。

    在生理?xiàng)l件下，hpmcs可以產(chǎn)生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，幾乎能降解全部ecm成分。timps是內(nèi)源性分泌蛋白，作為mmps的特異性抑制因子，其n'端可與相應(yīng)的mmps催化活性中心的鋅離子結(jié)合而抑制其催化活性［7］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型膠原及其降解酶系mmp1/timp1分泌及表達(dá)的影響，旨在探討川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖環(huán)境下ⅰ型膠原的合成和降解的干預(yù)作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示，川芎嗪能顯著降低高糖所致的ⅰ型膠原的過(guò)度合成，同時(shí)顯著下調(diào)timp1的表達(dá)，增加mmp1的表達(dá)，提示川芎嗪亦能通過(guò)調(diào)節(jié)mmp1/timp1的平衡，從而促進(jìn)ⅰ型膠原的降解，減少ecm沉積。由此我們推測(cè)，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用。

    川芎嗪是中藥川芎的有效成分之一，屬酰胺類生物堿，具有活血化瘀的功效。藥理實(shí)驗(yàn)證明，川芎嗪具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫和鈣離子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型膠原、timp1和增加mmp1表達(dá)的機(jī)制尚不清楚。以往的研究發(fā)現(xiàn)這可能與抑制轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factorβ1, tgfβ1）表達(dá)有關(guān)［9, 10］。tgfβ1是重要的致纖維化細(xì)胞因子，參與了腹膜纖維化的病理過(guò)程［2］。tgfβ1可增加ⅰ型膠原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型膠原降解減少［3, 11］。有研究報(bào)道，川芎嗪能降低多種細(xì)胞如心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的膠原合成和timp1表達(dá)，而增加mmp1的分泌和表達(dá)，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這可能是通過(guò)抑制tgfβ/smads信號(hào)傳導(dǎo)通路繼而抑制tgfβ1表達(dá)的結(jié)果［9, 10, 12］。我們前期研究證實(shí)，川芎嗪能下調(diào)高糖致hpmcs tgfβ1的表達(dá)（文章待發(fā)表）。因此我們推測(cè)，川芎嗪抑制tgfβ1的表達(dá)可能是其抑制hpmcs ⅰ型膠原合成和調(diào)整mmp1/timp1表達(dá)平衡的機(jī)制之一，其具體機(jī)制將是我們下一步要研究的內(nèi)容。

    綜上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型膠原的過(guò)度合成，并且通過(guò)調(diào)節(jié)mmp1/timp1的平衡，促進(jìn)ⅰ型膠原降解，從而減少ecm的沉積，防止腹膜纖維化的發(fā)生和發(fā)展。因此，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用，這對(duì)腹膜纖維化的機(jī)制及其防治的研究有一定借鑒和應(yīng)用價(jià)值。

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