摘要：目的:探討骨碎補總黃酮(osteopractic total flavone,OTF)對納米羥基磷灰石-膠原(nano-hydroxyapatite collagen,nHAC)復(fù)合材料與成骨細胞-血管內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)體系中血管內(nèi)皮細胞增殖的影響。方法:分別以濃度為500 μg·mL^-1 、250 μg·mL ^-1 、100 μg·mL^-1 、50 μg·mL ^-1 及0 μg·mL^-1 的OTF溶液干預(yù)生長在nHAC復(fù)合材料上的hFOB1.19人成骨細胞,干預(yù)24 h后收集5種上清液。再分別以5種上清液和人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)培養(yǎng)基混合培養(yǎng)HUVEC,培養(yǎng)24 h和48 h后進行劃痕實驗,計算細胞遷移率,確定OTF溶液最佳干預(yù)濃度和時間。在4個培養(yǎng)皿中鋪滿nHAC復(fù)合材料,加入DMEM/F12。A培養(yǎng)皿中不添加其他材料;B、D培養(yǎng)皿中接種hFOB1.19人成骨細胞,預(yù)培養(yǎng)24 h使細胞貼壁;C、D培養(yǎng)皿中加入OTF溶液,根據(jù)上一步劃痕實驗確定的最佳干預(yù)濃度和時間進行干預(yù)。干預(yù)結(jié)束后收集各培養(yǎng)皿中的上清液進行后續(xù)實驗。接種HUVEC于HUVEC培養(yǎng)基上,分為空白組和A、B、C、D共5組;空白組不添加其他材料,A、B、C、D組分別加入A、B、C、D培養(yǎng)皿上清液;以CCK-8法測定細胞增殖率,HE染色后觀察HUVEC形態(tài),以ELISA法檢測血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和成纖維細胞生長因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)含量。結(jié)果:①OTF溶液最佳干預(yù)濃度與時間檢測結(jié)果。5種濃度OTF溶液干預(yù)后,0~24 h細胞遷移率的差異有統(tǒng)計學意義[(16.46±4.01)%,(21.71± 1.30)%,(24.94±3.47)%,(22.08±2.46)%,(21.34±2.28)%, F=4.564,P =0.013],其中100 μg·mL ^-1 OTF溶液干預(yù)后的細胞遷移率高于其余4組( P=0.001,P=0.020,P=0.014,P =0.029);24~48 h細胞遷移率的差異無統(tǒng)計學意義[(6.06± 1.22)%,(5.37±1.85)%,(5.58±1.88)%,(6.14±1.52)%,(4.99±1.25)%, F=0.374,P =0.823]。提示OTF溶液最佳干預(yù)濃度為100 μg·mL ^-1 ,最佳干預(yù)時間為24 h。②HUVEC細胞活性檢測結(jié)果。時間因素與分組因