快速檢測(cè)漢灘病毒新型實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法的建立與應(yīng)用
作者：何芳; 楊鵬飛; 陳國清; 唐麗; 燕清麗; 劉純成; 趙懷榮 淮安市疾病預(yù)防控制中心; 江蘇淮安223001; 鹽城市疾病預(yù)防控制中心
摘要：目的建立一種漢灘型漢坦病毒(Hantaan virus,HTNV)熒光定量(RT-PCR)的檢測(cè)方法,以便快速準(zhǔn)確地檢測(cè)HTNV。方法利用Beacon Designer7.0設(shè)計(jì)引物和探針,以HTNV的S基因片段為模板,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR,評(píng)價(jià)此方法的特異性及靈敏度。結(jié)果建立的RT-PCR方法對(duì)HTNV的最低檢出限為4.08 copies/μL,模板Ct值與稀釋濃度的對(duì)數(shù)之間具有良好的線性關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=-3.4118X+41.997,擴(kuò)增效率為96.4%,R^2=0.994。結(jié)論所建立的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法靈敏度高、特異性好,可應(yīng)用于HTNV的快速檢測(cè)。
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