DDR2血管內皮細胞條件性基因敲除小鼠的復制、鑒定及表型分析
作者：王婷婷; 卜歆; 李金奎; 王娜; 邱意開; 岳振生; 蘇金; 張淑雅 寧夏醫科大學基礎醫學院生育力保持教育部重點實驗室(生物化學與分子生物學系); 寧夏銀川750004; 空軍軍醫大學基礎醫學院生物化學與分子生物教研室; 陜西西安710032; 寧夏醫科大學總醫院急診科; 寧夏銀川750004
摘要：目的應用Cre/LoxP系統復制盤狀結構域受體2(DDR2)在血管內皮細胞可誘導性條件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝臟中的表型。方法復制DDR2打靶載體,通過電轉入小鼠胚胎干細胞(ES細胞)打靶,通過聚合酶鏈反應(PCR)+脫氧核糖核酸(DNA)印跡法鑒定篩選陽性ES細胞,將陽性的ES細胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受體小鼠子宮以獲得嵌合體小鼠。將得到的嵌合體小鼠與C57BL/6N小鼠回交得到F0雜合子,F0代雜合小鼠自交篩選獲得F1代DDR2flox/flox小鼠,該小鼠與Cdh5-Cre/ERT2小鼠雜交,通過子代自交獲得DDR2在血管內皮細胞可誘導性條件性基因敲除(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2)小鼠。他莫昔芬誘導血管內皮細胞上DDR2基因敲除,對小鼠進行表型分析。結果獲得DDR2血管內皮細胞可誘導性條件性基因敲除小鼠DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),DDR2i EC小鼠出生時符合孟德爾遺傳定律,發育良好,他莫昔芬誘導敲除小鼠血管內皮細胞DDR2基因表達后,小鼠出現自發性肝纖維化及黃體血管新生障礙等表型。結論成功復制DDR2血管內皮細胞可誘導性條件性基因敲除小鼠模型。血管內皮細胞DDR2缺失能導致自發性肝纖維化。
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中國現代醫學雜志
中國現代醫學雜志， 半月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創新性，刊載內容涉及的欄目：專家述評、消化系統疾病專題·論著、實驗研究·論著、消化系統疾病專題·綜述、臨床研究·論著等。于1991年經新聞總署批準的正規刊物。
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