從江香豬源Ⅰ、Ⅱ型干擾素生菜中融合表達及其生物活性
摘要：干擾素(interfern,IFN)是在特定的誘生劑作用下,由細胞產生的一種具有高度生物活性的糖蛋白,具有廣譜抗病毒活性。從江香豬源Ι型干擾素α2和Ⅱ型干擾素γ于生菜中融合表達及生物活性研究未見報道。本研究應用生菜植物表達系統,將從江香豬源干擾素植物表達載體PBI121-IFNα2、PBI121-IFNα2γ、PBI121-IFNγ、PBI121-Vec轉入根癌農桿菌LBA4404中,用真空滲透法將攜帶干擾素質粒的根癌農桿菌感染生菜葉片;用β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)染色和酶聯免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測從江香豬源干擾素在生菜葉片中的表達;用實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,Q-PCR)技術分析從江香豬源干擾素蛋白活性。結果顯示:GUS染色和ELISA檢測證明從江香豬源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中實現了表達;Q-PCR檢測顯示:在Marc-145細胞上從江香豬源干擾素蛋白對PRRSV的復制有明顯抑制作用,在PK15細胞上從江香豬源干擾素蛋白對干擾素γ誘導蛋白30(interferon-gamma-inducible protein 30,IFI30)、2′-5′寡聚腺苷酸合成酶(2′-5′oligoadenylate synthetase,OAS)、抗黏液病毒蛋白(myxovirus resistance,MX)基因的mRNA水平的上調有一定的促進作用。本研究成功實現從江香豬源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中進行表達且表達蛋白具有生物學活性,為從江香豬源Ι型和Ⅱ型干擾素新復合型藥物植物蛋白的開發(fā)利用提供參考依據。
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中國獸醫(yī)學報雜志
中國獸醫(yī)學報雜志， 月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內容涉及的欄目：研究論文_預防獸醫(yī)學、研究論文_人獸共患病、研究論文_基礎獸醫(yī)學、研究論文_動物科學、綜述等。于1981年經新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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