miR-18a通過靶向結合CTGF調控豬顆粒細胞凋亡
作者：郭天亞; 黃龍; 馬夢楠; 姚望; 潘增祥 南京農業大學動物科技學院; 江蘇南京210095
摘要：為探究miR-18a對豬卵巢顆粒細胞凋亡的調控作用,利用生物信息學分析、熒光素酶活性檢測和體外培養顆粒細胞試驗驗證miR-18a對CTGF的靶向作用及其在豬顆粒細胞中對CTGF基因表達的影響,并通過流式細胞技術檢測其對豬卵巢顆粒細胞凋亡的調控作用。生物信息學分析結果表明,CTGF是miR-18a的潛在靶基因,熒光素酶活性檢測進一步驗證了miR-18a與CTGF的結合。在培養的顆粒細胞中轉染miR-18a模擬物后,qRT-PCR和Western blot結果顯示CTGF的mRNA和蛋白水平均顯著降低,流式細胞技術檢測表明miR-18a顯著促進顆粒細胞的凋亡。而轉染miR-18a抑制劑后,豬顆粒細胞的凋亡率顯著降低,共轉染miR-18a抑制劑和CTGF的干擾RNA后,顆粒細胞的凋亡率呈現回升。試驗結果表明miR-18a通過靶向結合CTGF基因調控豬顆粒細胞的凋亡。
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