過表達EB病毒潛伏期膜蛋白1(LMP1)的人B淋巴細胞株的建立
作者：張令歌; 趙旋; 辛苗苗; 王麗芹; 溫大蔚; 高巖巖; 羅兵; 孫明姝 青島大學附屬醫院風濕免疫科; 山東青島266000; 青島大學轉化醫學研究院; 山東青島266021; 青島大學醫學院微生物教研室; 山東青島266021
摘要：目的構建EB病毒潛伏期膜蛋白1(LMP1)基因的真核表達載體,通過電穿孔法轉染人B淋巴瘤細胞株Ramos細胞,建立穩定的LMP1表達細胞株。方法擴增帶有EcoRⅠ與BamHⅠ酶切位點的LMP1編碼基因,克隆至pcDNA3.1-EF1a-mcs-3FLAG-CMV-EGFP真核表達載體,挑取陽性單克隆感受態細胞行PCR以及測序后將重組質粒通過電穿孔法轉染Ramos細胞, G418篩選穩定表達LMP1的細胞株, PCR和Western blot法分別檢測LMP1 mRNA和蛋白在Ramos細胞中的表達。結果 PCR與測序證實成功構建了LMP1重組質粒,建立了穩定轉染的Ramos細胞,且LMP1蛋白可在細胞中成功表達。結論成功建立了穩定表達LMP1的Ramos細胞。
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細胞與分子免疫學雜志
細胞與分子免疫學雜志， 月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創新性，刊載內容涉及的欄目：專家論壇、基礎研究、抗體工程、技術方法等。于1985年經新聞總署批準的正規刊物。
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