摘要：以實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的N端融合SUMO標(biāo)簽的多形擬桿菌肝素酶Ⅰ(SUMO-Bt-Hep Ⅰ)生產(chǎn)菌株重組大腸桿菌Rosetta(DE3)/pE-SUMO-Bt-HepⅠ為研究對象,通過單因素確定其最佳表達(dá)條件:誘導(dǎo)溫度25℃、誘導(dǎo)劑濃度0.4mmol/L、誘導(dǎo)時(shí)間12 h;首先通過Plackett-Burman試驗(yàn),篩選出培養(yǎng)基中3個(gè)主要影響酶活的因素:葡萄糖、酵母提取物和蛋白胨。并通過響應(yīng)面試驗(yàn)確定最佳培養(yǎng)基為:葡萄糖9.52g/L,酵母提取物9.61g/L,蛋白胨19.92g/L,硫酸銨4g/L,磷酸氫二鈉18g/L,磷酸二氫鉀3g/L,硫酸鎂5g/L。在此最佳培養(yǎng)基下發(fā)酵酶活預(yù)測可達(dá)55133IU/L,3次驗(yàn)證試驗(yàn)獲得的SUMO-Bt-HepI酶活力平均為56961 IU/L,與理論預(yù)測值接近,比優(yōu)化前(24215.9 IU/L)提高了2.3倍。通過5L發(fā)酵罐的分批補(bǔ)料擴(kuò)大培養(yǎng)得到的最高發(fā)酵酶活為3.937×10^5IU/L,比搖瓶提高了6.91倍,這是目前報(bào)道發(fā)酵生產(chǎn)肝素酶I的最高水平,對工業(yè)化應(yīng)用具有一定的指導(dǎo)意義。