摘要：2A肽的核糖體跳躍技術是一種新型技術。其2A肽是長度為18~22個氨基酸的順式作用水解酶元件,具有結構短小、蛋白分割效率高的特點,因而被越來越多應用于多順反子表達載體的構建中。該項技術目前主要集中于酵母(Saccharomyces cerevisiae)和哺乳動物細胞的研究中,在植物中的報道較少。為探索該技術在植物中的應用研究,本研究利用豬捷申病毒2A (Porcine teschovirus-1 2A, P2A)和東亞細亞病毒2A (Thosea asigna virus 2A, T2A),首次將人工合成的轉錄因子XVE (X, the DNA-binding domain of the bacterial repressor LexA;V, the acidic transactivating domain of VP16;E, the regulatory region of the human estrogen receptor)、綠色熒光蛋白基因(green fluorescent protein, GFP)和抗除草劑基因(bialaphos resistance,Bar)3個基因的開放閱讀框(open reading fragment, ORF)串聯后受35S啟動子調控,構建成多順反子共表達載體pX6-2A,轉化擬南芥(Arabidopsis thaliana)后經PCR鑒定獲得了轉基因陽性植株;Western blot結果顯示XVE,GFP和Bar 3個目的蛋白全部被分割完成,說明P2A和T2A肽在植物材料中可以轉錄、表達和翻譯,且在分割過程中不會互相干擾,是一種理想的多順反子表達方式。本研究結果表明P2A和T2A在植物材料中能夠完成高效分割,行使其'核糖體跳躍'的功能,適用于在植物材料中的應用研究,該研究結果對2A肽在轉基因植物中的推廣應用具有重要的理論和借鑒意義。