摘要:[目的]本文旨在克隆不結球白菜BcATPA(ATPase alpha subunit)基因并研究其功能及其在不育系和可育系中的表達差異。[方法]構建BcATPA重組質粒,在NCBI數據庫進行核苷酸序列分析,得到不結球白菜ATPA基因全長序列。利用實時定量PCR技術檢測BcATPA基因在不結球白菜保持系和不育系的不同組織和器官及不同小孢子發育時期的時空表達情況。[結果]獲得了不結球白菜ATPA基因全長序列,命名為BcATPA。該基因的核苷酸序列全長為1 806 bp,其最大開放閱讀框長度為1 527 bp,編碼508個包含F1-ATP酶α亞基保守區域的氨基酸,并且含有ATP結合、walker A motif和walker B motif等位點,而且在287~315的位置含有29個氨基酸的跨膜區域。BcATPA與蕓薹屬中的芥菜、甘藍型油菜和擬南芥親緣關系特別近,二級結構和三級結構預測表明,該基因與ATP結合有關。實時熒光定量PCR結果表明,BcATPA在不育系中的表達水平高于保持系,在花瓣、萼片中表達水平較高。在整個小孢子發育時期,不育系中BcATPA基因表達量逐漸降低;而在保持系中,從四分體時期開始顯著下降,因此不育系與保持系表達量差異逐漸加大。[結論]BcATPA基因在不結球白菜不育系和保持系的各個器官和整個小孢子發育時期的表達水平存在差異,研究結果為進一步研究BcATPA基因與細胞質雄性不育之間的關系提供了理論依據。
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