摘要:【目的】意大利蝗Calliptamus italicus是新疆草原的主要優(yōu)勢(shì)危害種,以卵在土壤中越冬。呼吸代謝可反映蝗卵的生理狀態(tài),呼吸蛋白對(duì)于呼吸系統(tǒng)不完善的蝗卵尤為重要。本研究旨在明確意大利蝗卵發(fā)育過(guò)程中血藍(lán)蛋白基因的表達(dá)情況。【方法】采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)不同發(fā)育階段的蝗卵以及1齡蝗蝻的血藍(lán)蛋白2個(gè)亞基基因Hc1和Hc2的表達(dá)量。【結(jié)果】根據(jù)解剖形態(tài)觀察,將意大利蝗越冬卵的整個(gè)發(fā)育過(guò)程分為10個(gè)階段,包括9個(gè)卵發(fā)育階段(C-Ⅰ-C-Ⅹ)和1齡蝗蝻階段(C-Ⅹ)。Hc1和Hc2在越冬蝗卵各發(fā)育階段以及1齡蝗蝻中均有表達(dá)。其中,在蝗卵早期發(fā)育階段(C-Ⅰ,C-Ⅱ和C-Ⅲ),Hc1表達(dá)量逐漸增加,C-Ⅲ階段表達(dá)量顯著高于C-Ⅰ和C-Ⅱ階段;滯育階段(C-Ⅳ,C-Ⅴ和C-Ⅵ),胚胎發(fā)育停滯,Hc1表達(dá)量較C-Ⅲ,C-Ⅶ和C-Ⅷ階段低;滯育后發(fā)育階段(C-Ⅶ和C-Ⅷ),蝗卵解除滯育,快速發(fā)育,Hc1表達(dá)量較早期發(fā)育階段和滯育階段高,其中,C-Ⅷ階段Hc1表達(dá)量最高(212.3156±10.5470),顯著高于其他所有階段;1齡蝗蝻(C-Ⅹ)的Hc1表達(dá)量最低,為0.4017±0.1010。Hc2表達(dá)量在C-Ⅴ階段最高(679.7511±54.5719),顯著高于其他所有階段;除C-Ⅴ階段外,其他各階段之間Hc2表達(dá)量差異均不顯著。Hc1在蝗卵滯育后階段高表達(dá),而Hc2在蝗卵滯育階段高表達(dá)。【結(jié)論】血藍(lán)蛋白亞基基因Hc1和Hc2在整個(gè)意大利蝗卵發(fā)育過(guò)程均有表達(dá),且具有階段特異性。Hc1與Hc2協(xié)同作用為蝗卵發(fā)育供氧,其中,Hc1主要負(fù)責(zé)蝗卵滯育后發(fā)育期間的氧氣運(yùn)載,而Hc2主要維持滯育期間的氧氣運(yùn)載,且載氧效率較低。研究結(jié)果可為進(jìn)一步探討意大利蝗卵的抗逆機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。
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