體外定向誘導胚胎干細胞分化為內皮細胞及其與臍靜脈內皮細胞的比較
作者：汪雁歸; 毛蕭蕭; 楊天倫 中南大學湘雅醫院心內科; 長沙410008; 湖南省人民醫院老年病科; 長沙410005
摘要：目的：研究干細胞定向分化為內皮細胞的效率,并與人臍靜脈內皮細胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）比較。方法：用兩步法誘導干細胞HUES9分化為內皮細胞,前3 d在N2B27培養基中加入骨形態發生蛋白4（25 ng/m L）和肝糖原合成激酶3β受體的選擇性抑制劑CHIR99021（10μmol/L）使細胞分化到中胚層狀態,第4天開始用VEGF165（200 ng/m L）和Forskolin（2μmol/L）將細胞誘導為內皮細胞。觀察分化第6天細胞形態,并與HUVECs比較。用CD144作為內皮細胞表面標志物,流式細胞術檢測分化效率及分化后細胞的身份。比較兩種內皮細胞遷移和成管能力。結果：分化后的內皮細胞與HUVECs在顯微鏡下形態一致。分化細胞表面標志物陽性率達到73.4%,重新培養后的內皮細胞表面CD144陽性率達到86.6%,HUVECs為94.4%。分化后的內皮細胞與HUVECs均具有良好的遷移和成管能力,但分化后的內皮細胞能力不如HUVECs強。運用SB431542后,能夠提高分化后內皮細胞的遷移和成管能力。結論：此兩步法將干細胞分化為內皮細胞有較高的分化效率,可作為理想的分化方法。
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湖南醫科大學學報雜志
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