騰沖紅花油茶花蜜蛋白1,6-二磷酸果糖醛縮酶的鑒定、克隆與分析
摘要：為鑒定出花蜜中某些影響花蜜化學(xué)組成的功能蛋白,并探討其在花蜜分泌及組分調(diào)控過程中的功能,以騰沖紅花油茶為試驗材料,利用MALDI-TOF/MS質(zhì)譜分析方法初步鑒定出騰沖紅花油茶花蜜中含有1,6-二磷酸果糖醛縮酶(FBP2),然后根據(jù)質(zhì)譜得到的部分肽段序列設(shè)計特異性引物,采用SMART RACE方法克隆騰沖紅花油茶花蜜FBP2全長cDNA,命名為CRFBPase (GenBank登錄號:MG764086)。序列分析表明,該cDNA全長1 077 bp,編碼358個氨基酸,分子質(zhì)量為38 428.13 Da,等電點為7.56。經(jīng)同源比對分析發(fā)現(xiàn)CRFBPase基因序列與普通油茶的FBP2基因序列同源性高達(dá)98.8%,同時酶活檢測結(jié)果也進一步證實該花蜜中含有FBP2,且該酶的活性會隨著花蜜分泌累積時間的延長而增加。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,CRFBPase基因在開花后第5天的蜜腺和花部組織中均有一定量的表達(dá)且蜜腺中表達(dá)量最高,開花后第5天(泌蜜高峰期)蜜腺顯著高于花蕾期。本研究結(jié)果為進一步揭示FBP2在植物花蜜形成、分泌及糖組分調(diào)控過程中的作用機制提供了一定的理論依據(jù)。
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