摘要：目的建立人主動脈夾層(AD)血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)體外培養(yǎng)的方法。方法以AD患者手術(shù)時切除的血管為原料,用組織塊貼壁法進(jìn)行VSMC的體外原代和傳代培養(yǎng),倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的生長情況,考馬斯亮藍(lán)染色、α-SMA及Ⅷ因子免疫熒光染色和透射電鏡檢測鑒定細(xì)胞。結(jié)果7~10d原代細(xì)胞從組織塊邊緣遷移出來,3~4周細(xì)胞生長至融合,可進(jìn)行傳代。原代和傳代的細(xì)胞生長良好,倒置顯微鏡下見細(xì)胞呈長梭形,有多個突起。細(xì)胞呈"峰谷狀"生長,具有典型的VSMC特征?？捡R斯亮藍(lán)染色和透射電鏡下均可見細(xì)胞內(nèi)有大量沿長軸生長的肌絲,α-SMA免疫熒光染色強陽性,Ⅷ因子免疫熒光染色陰性,證明所培養(yǎng)的細(xì)胞為VSMC。細(xì)胞傳代至第6代以后開始出現(xiàn)老化現(xiàn)象。結(jié)論應(yīng)用組織塊貼壁培養(yǎng)的方法可成功地在體外培養(yǎng)人AD的VSMC,為今后研究AD的發(fā)病機(jī)制提供良好的實驗基礎(chǔ)。