基于喜樹堿生物合成的喜樹內生菌及其關鍵酶基因克隆
作者：萬如意; 高琳; 蘇瑩瑩; 叢云寒; 姜逸; 金朝霞 大連工業大學生物工程學院; 遼寧大連116034
摘要：以喜樹內生菌為研究對象,經發酵培養后提取喜樹堿及其衍生物,采用HPLC法對發酵液中喜樹堿及其衍生物進行定性檢測,獲得能夠產生喜樹堿(CPT)及10-羥基喜樹堿(HCPT)的喜樹內生菌。通過對喜樹堿生物合成途徑的研究,選取10-羥基香葉醇羥化酶(G10H)、10-羥基香葉醇脫氫酶(HGO)、色氨酸脫羧酶(TDC)和異胡豆苷合酶(STR)4個關鍵酶基因作為研究對象,設計特異性引物,克隆目的基因。提取喜樹RNA,經反轉錄合成cDNA,同時提取喜樹內生菌DNA。分別以植物cDNA和內生菌DNA作為模板,篩選鑒定喜樹堿合成途徑的關鍵酶基因G10H、HGO、TDC和STR并與喜樹關鍵酶基因進行比較,初步解析喜樹堿代謝途徑,為喜樹內生菌發酵合成喜樹堿及其衍生物提供理論依據。
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大連工業大學學報雜志
大連工業大學學報雜志， 雙月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創新性，刊載內容涉及的欄目：食品與生物工程、紡織與材料工程、機械工程與自動化、信息科學與技術等。于1981年經新聞總署批準的正規刊物。
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