摘要:【目的】探究黃花蒿沒藥醇合酶第296位氨基酸突變抑制環(huán)化反應的機制?!痉椒ā坷肣uik Change R Multi Site-Directed Mutagenesis的方法將黃花蒿沒藥醇合酶的296位氨基酸殘基由蘇氨酸突變成異亮氨酸。原核表達,蛋白純化后測定其催化特異性?!窘Y果】黃花蒿沒藥醇合酶T296I體外催化(2E,6E)-法尼基焦磷酸主產物為非環(huán)化的法尼烯;但是將T296I蛋白與中間體(3R,6E)-橙花叔醇焦磷酸一起孵育時可生成環(huán)化的主產物α-bisabolol,野生型酶的天然產物?!窘Y論】黃花蒿沒藥醇合酶T296I點突變進一步證明氨基酸殘基的空間體積和立體化學是自然環(huán)化反應起始的控制關鍵,其位阻效應能夠抑制法尼基焦磷酸向橙花叔醇焦磷酸轉化。
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北京農學院學報雜志, 季刊,本刊重視學術導向,堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內容涉及的欄目:生物學、園藝科學、畜牧獸醫(yī)、園林、食品科學等。于1983年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。